• / 6
  • 下載費用:30 金幣  

一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法.pdf

關 鍵 詞:
一種 真菌 利用 發酵 食用菌 制備 生物 磷肥 方法
  專利查詢網所有資源均是用戶自行上傳分享,僅供網友學習交流,未經上傳用戶書面授權,請勿作他用。
摘要
申請專利號:

CN201310708250.6

申請日:

2013.12.20

公開號:

CN103695318A

公開日:

2014.04.02

當前法律狀態:

授權

有效性:

有權

法律詳情: 授權|||實質審查的生效IPC(主分類):C12N 1/14申請日:20131220|||公開
IPC分類號: C12N1/14; C05F11/08; C05F17/00; C05F11/02; C12R1/685(2006.01)N 主分類號: C12N1/14
申請人: 云南金雨莊生物科技有限責任公司
發明人: 楊舒惠
地址: 650224 云南省昆明市萬華路245號3棟一單元501室
優先權:
專利代理機構: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114 代理人: 唐德林
PDF完整版下載: PDF下載
法律狀態
申請(專利)號:

CN201310708250.6

授權公告號:

||||||

法律狀態公告日:

2015.11.11|||2014.04.30|||2014.04.02

法律狀態類型:

授權|||實質審查的生效|||公開

摘要

本發明涉及一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,屬于微生物菌肥技術領域。本發明的解磷真菌為黑曲霉Aspergillusniger?YSH?菌株,該菌株2013年11月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號:CGMCCNo.8480。利用本發明的微生物通過堆肥發酵方法能將各種食用菌菌渣在7內徹底腐熟轉化為生物磷肥。制備的生物磷肥對油菜、番茄等作物生長、產量具有良好的促進作用,能夠替代化學磷肥。本發明制備的生物磷肥具有成本低、肥效高、無殘留、對人畜安全的特點,是有機農業種植中的高效生物菌肥。

權利要求書

權利要求書
1.  一種解磷真菌,其特征在于解磷真菌所用的微生物為黑曲霉Aspergillus niger  YSH菌株,該菌株2013年11月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號:CGMCC No.8480。

2.  一種利用解磷真菌發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,其特征在于該方法包括:
(1)黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株的種子培養:將黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480的菌體接種到PDA培養基斜面上,20-30℃下培養4-8天后獲得斜面種子;將斜面種子接種到三角瓶中的PDA培養基中,20-30℃,100-250 rpm條件下搖床培養4-7天獲得液體種子;將液體種子按體積百分比1.5-5.5%的比例接入發酵罐中的MC培養基中,在10-1000升發酵罐中的培養獲得大量液體種子,發酵罐培養的條件控制在:溫度26-30℃,攪拌速度100-200rpm,發酵時間4-6天;
(2)黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株發酵菌渣制備生物磷肥:將食用菌廢菌渣粉碎打散,將食用菌廢菌渣與草炭土按重量比為10:1到1:10的比例混勻后,按基質重量的0.1%到10%接種黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株液體種子,充分混勻后將基質含水量調節到40-55%,將最終的基質在室內按梯形堆垛,發酵7天后將發酵終產物在65℃以下烘干或晾干至水分含量小于5%,粉碎后制成生物菌肥。

3.  如權利要求2所述的利用解磷真菌發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,其特征在于:所述方法中,利用的菌渣主要包括平菇、香菇、金針菇、雙孢蘑菇、草菇的菌渣。

說明書

說明書一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法
技術領域
本發明涉及利用一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,屬微生物菌肥技術領域。
背景技術
磷是植物生長發育所必需營養元素之一,在植物的生長和發育中的作用僅次于氮。我國有74%的耕地處于缺磷狀態,為了確保農作物生長所必需的磷素營養,每年必須向農田土壤中施入大量的化學磷肥。但施入的化學肥料僅有5%~25%可被植物吸收利用,絕大部分磷肥則很快與土壤中的其它成分發生反應變成植物不能吸收利用的難溶性磷酸鹽或以吸附態形式滯留于土壤中(Singh & Kapoor, 1994)。解磷微生物可通過分泌各種有機酸,無機酸等途徑溶解礦物磷,釋放可溶性磷供植物生長需要(Song et al., 2008)。食用菌產業是我國大力發展的特色產業之一。按照目前人工栽培食用菌的產量,每年的菌渣產量在1000萬噸左右。而且,隨著政策導向和扶持力度的加大,菌渣產量將隨著人工食用菌產量增加而增加。目前,國外對菌渣的循環利用主要集中在有機肥、育苗基質和燃料方面。利用菌渣發酵生產的有機肥和育苗基質不僅有利于改善土壤結構,增加肥力,而且對于去除土壤多種有機污染物有很好的效果。Chiu et al.(2009)利用平菇菌渣堆肥在石油工業區施用,對于去除土壤殘留石油和生態修復有很好的效果。Lau et al.(2003)報道施用平菇菌渣堆肥能有效去除土壤中的多環芳香化合物(PAH)類污染物。Law et al.(2003)利用平菇菌渣堆肥有效去除環境中的化學農藥五氯苯酚殘留物。在能源利用方面,將菌渣與煤礦殘渣混合加工的燃料產品甚至可以替代工業用煤(Ryu et al., 2008;Karen et al., 2009)。國內對菌渣的利用報道主要體現在用作果樹、花卉的底肥(王揚軍等,2006),蔬菜育苗基質(李曉強等,2006),沼氣發酵底物(焦鐳 & 紫夢穎,2003)。總體而言,菌渣在有機肥方面的利用量最大。從上述的利用途徑可以看出,菌渣作為肥料、燃料使用的附加值不高。而且,國內實現菌渣規模化循環利用的企業不多,大量的菌渣被當著垃圾遺棄,既浪費資源,還造成嚴重的環境污染(包括菌袋的白色污染)。如何高附加值地實現這一資源的循環利用對食用菌栽培大省而言具有重要的經濟價值和社會意義。利用解磷真菌發酵菌渣制備的生物肥料不僅具有常規有機肥的高效,還具有微生物磷肥的功能,應用前景十分廣闊。
發明內容
本發明的目的在于提供一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法。這種解磷真菌所用的微生物為黑曲霉Aspergillus niger  YSH菌株,該解磷真菌能快速腐熟食用菌菌渣,利用該微生物制備的生物磷肥既具有常規有機肥的功能;同時,菌肥中含有生物量很高的解磷真菌,可直接作為解磷菌肥替代化學磷肥在農業生產中應用。
本發明的目的是這樣實現的:
本發明的解磷真菌所用的微生物是采用篩選解磷微生物的常規方法,從貴州省甕福磷礦廠灌木植物根際土中篩選獲得解磷真菌Aspergillus niger YSH菌株。為黑曲霉Aspergillus niger菌株,該菌株2013年11月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號:CGMCC 8480。
黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株在CA培養基(NaNo3 3g, K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4·7H2O 0.5g, FeSO4·7H2O 0.01g,蔗糖 30g, 瓊脂15g,補水至1000ml)上25℃下培養6天,菌落圓形,表面呈深棕色或黑色。分生孢子囊直徑約11-20μm,球狀,深棕色,隨著培養時間的延長逐漸分開成許多單列。分生孢子梗透明,或在朝向孢子囊的部分變暗。分生孢子頭二列,附有棕色瓶梗,孢子球狀或近球狀,直徑3.6-5.5μm,深棕色或黑色,外表粗糙。分生孢子大小為2.5-5μm(長)×3-4.5μm(寬)。
本發明的利用解磷真菌發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,該方法包括:
黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株的種子培養:將黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480的菌體接種到PDA培養基斜面上,20-30℃下培養4-8天后獲得斜面種子,PDA培養基為:去皮馬鈴薯200g切碎,用水煮沸30分鐘后過濾取濾液,蔗糖20g,瓊脂 20g,補水至1000 ml,pH自然;將斜面種子接種到三角瓶中的PDA培養基中,20-30℃,100-250 rpm條件下搖床培養4-7天獲得液體種子;將液體種子按體積百分比1.5-5.5%的比例接入發酵罐中的MC培養基中,在10-1000升發酵罐中的培養獲得大量液體種子,MC培養基為:糖蜜30 g,玉米粉5g,硫酸銨 5g,氯化鈉 6g,硫酸二氫鉀 0.5g,磷酸三鈣5g,水1000 ml,pH 6.5-7.0。發酵罐培養的條件控制在:溫度26-30℃,攪拌速度100-200rpm,發酵時間4-6天;
(2)黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株發酵菌渣制備生物磷肥:將食用菌廢菌渣粉碎打散,將食用菌廢菌渣與草炭按重量比為10:1到1:10的比例混勻后,按基質重量的0.1%到10%接種黑曲霉Aspergillus niger  YSH CGMCC 8480菌株液體種子,充分混勻后將基質含水量調節到40-55%,將最終的基質在室內按梯形堆垛,發酵7天后將發酵終產物在65℃以下烘干或晾干至水分含量小于5%,粉碎后制成生物菌肥。
本發明的利用解磷真菌發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法,所述方法中,利用的菌渣主要包括平菇、香菇、金針菇、雙孢蘑菇、草菇的菌渣。
本發明利用解磷真菌黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株發酵食用菌菌渣制備的生物有機肥在土壤磷酸鹽含量較高的土壤中可替代化學磷肥。
本發明的效果:利用黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株發酵食用菌菌渣制備的生物有機肥具有成本低、肥效好、無污染、對人畜安全的特點,是有機農業種植中化學磷肥的高效替代產品。
具體實施方式
實施例1: 黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株的培養
黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株試管斜面種子培養:將該菌株的菌體接種到PDA培養基斜面上,28℃下培養5天后獲得斜面種子。
黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株液體種子的培養:將斜面種子接種到三角瓶中的MC培養基(糖蜜30 g,玉米粉5g,硫酸銨 5g,氯化鈉 6g,硫酸二氫鉀 0.5g,磷酸三鈣5g,水1000 ml,pH 6.5-7.0)中,28℃,200 rpm條件下培養5天獲得。
黑曲霉CGMCC 8480菌株液體種子的發酵罐大量培養:將液體種子按1.5-5.5%(V/V)的比例接入發酵罐中的MC培養基中,在10-1000升發酵罐中的培養條件控制在:溫度26-30℃,攪拌速度100-200rpm,發酵時間4-6天。
實施例2: 黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株發酵袋裝食用菌菌渣制備生物磷肥的方法
將平菇、香菇、金針菇等袋料栽培的菌渣粉碎打散,將菌渣與草炭按重量比為10:1到1:10的比例混勻后,按基質重量的0.1%到10%接種黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480液體種子,充分混勻后將基質含水量調節到40-55%,將最終的基質在室內按梯形堆垛,堆體的下底長1.5米,上底長1米,高1米,每3天翻堆一次,發酵7天后添將發酵終產物在65℃以下烘干或晾干至水分含量小于5%,粉碎后制成生物菌肥,用此發酵方法制備的生物磷肥,黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480的活菌數含量一般在1.5-8.5×109個/克。
3. 黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株覆土栽培食用菌菌渣制備生物磷肥的方法
將雙孢蘑菇、草菇等覆土栽培的食用菌菌渣與草炭按重量比為10:1到1:10的比例混勻后,按基質重量的0.1%到10%接種黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480液體種子,充分混勻后將基質含水量調節到40-55%,將最終的基質在室內按梯形堆垛,堆體的下底長1.5米,上底長1米,高1米,每3天翻堆一次,發酵7天后添將發酵終產物在65℃以下烘干或晾干至水分含量小于5%,粉碎后制成生物菌肥,用此發酵方法制備的生物磷肥,黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480的活菌數含量一般在1.00-9.95×109個/克。
4.生物磷肥在油菜種植中的應用試驗
供試作物:油菜Brassica napus,品種:Westar。
土壤:采自滇池富磷區的磷礦土。
供試生物菌肥:黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480的活菌數含量為7.5×109個/克的生物磷肥。
試驗方法:用3.5%的次氯酸鈉表面滅菌油菜種子8 min,用蒸餾水清洗3-4次除去次氯酸鈉后在常溫下放置60 min自然干燥。供試土壤充風干后經2mm孔徑的篩子過篩,按過篩土壤重量的1%加入生物磷肥并混合均勻,每盆裝入混有生物菌肥的土壤2.5kg,并將5顆油菜種子播入盆栽土壤上層1.5-2 cm深處,澆透水。之后視植物生長需要澆水保持水分,待種子發芽長出2片葉時每盆保留3株苗。以為添加生物菌肥的土壤處理為對照。統計油菜種子的發芽率,播種1個月時分別測定植物的根長,株高,葉片直徑,鮮重,干重。
試驗結果表明:空白對照中種子萌發率為75.6%,而施用本發明的生物菌肥的種子萌發率為100%,比對照提高了24.4%。播種1個月時,施用本發明的生物磷肥的油菜植株的平均根長,株高,葉片直徑,鮮重,干重比對照分別增加了51.8%、98.5%,74.6%,150.3%,142.6%。表明本發明的生物磷肥在土壤含磷量高的條件下,通過黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480菌株的解磷作用將土壤中植物不能利用的磷活化為能夠吸收利用的磷,進而有效促進油菜的生長。
5. 本發明的生物磷肥在番茄種植中的應用試驗
供試作物:番茄Solanum lycopersicum,品種:歐石大紅。
土壤:采自滇池富磷區的磷礦土。
供試肥料:黑曲霉Aspergillus niger  YSH  CGMCC 8480活菌數含量為7.5×109個/克的生物磷肥;商品有機肥。
試驗方法:用5%的次氯酸鈉表面滅菌番茄種子5-8分鐘,用清水清洗3-4次除去次氯酸鈉后在常溫下放置30分鐘自然干燥。供試土壤充風干后經2mm孔徑的篩子過篩,按過篩土壤重量的1%加入本方法制備的生物磷肥并混合均勻,每盆裝入混有生物菌肥的土壤2kg,并將10顆油菜種子播入盆栽土壤上層2cm深處,澆透水。之后視植物生長需要澆水保持水分,待種子發芽長出2片葉時每盆保留3株苗。分別以未施用任何肥料和添加等量商品有機肥的處理為對照,每處理3個重復。統計番茄種子的發芽率,播種60天時測定單株番茄果實數量和重量。
試驗結果表明:未施肥料的對照中番茄種子萌發率為76.41%,施用商品有機肥的對照中種子萌發率為96.54%,而施用生物磷肥的處理中種子萌發率高達97.69%,種子萌發率分別比兩對照提高了21.28%和1.15%。收獲時,未施肥料的對照中單株番茄果實平均數為14.62個,總重1.54kg,單果重98.67g;施用商品有機肥的對照中單株番茄果實平均數為11.85個,總重2.07kg,單果重152.63g;而施用本發明的生物磷肥的處理中單株番茄果實平均數為12.84個,總重2.57kg,單果重159.07g。可以看出施用本方法制備的生物磷肥和商品有機肥的單株番茄個數與不施肥料的相當,但總產量和單果重均高于不施肥料的處理,其中施用生物磷肥的單株產量和單果重量最高。 

關于本文
本文標題:一種解磷真菌及利用其發酵食用菌菌渣制備生物磷肥的方法.pdf
鏈接地址:http://www.pqsozv.live/p-6180845.html
關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

[email protected] 2017-2018 zhuanlichaxun.net網站版權所有
經營許可證編號:粵ICP備17046363號-1 
 


收起
展開
钻石光影